A.I. Polinova、D.R。 Zagirova、L.Yu。 コカエバ、I.I。 Busko、I。V. Levantsevich、S.N。 エランスキー
近年、ベラルーシではジャガイモや種子の植物検疫状態が著しく悪化しています。 アグロフィトセノーゼにおける特定の種類の有害生物の役割とそれらの比率が変化しました。 多くの蔓延している病気(後期枯病、交互症、あらゆる種類のかさぶた、細菌症、乾燥フサリウム腐敗)の有害性が増加しているだけでなく、傷水腐れなどの新しい、十分に研究されていない病気も増加しています(図1)。 この病気は、インド、中央アジア、その他の南部の国々で発生し、ベラルーシのゴメル、ブレスト、グロドノ、ミンスクの各地域で見られました。 他の土壌に生息する卵菌と同様に、P。ultimumは、長時間の雨の間に、水はけの悪い場所で、過度の湿気の状態で大きな損傷を引き起こします(Taylor et al。、2008)。
ベラルーシでは、成長期の気温が上昇する年に病気の蔓延が観察されました。ジャガイモのいくつかのバッチでは、塊茎の8〜10%が影響を受けました。 塊茎の傷ついた水っぽい腐敗は、抵抗力のある品種の欠如、発達した保護手段、および塊茎が影響を受けたときの病気の急速な発達によって引き起こされる重大な損傷を引き起こす可能性があります(Zhuromskaya、2003; Ivanyuk et al。、2005)。 この病気は塊茎にのみ影響します。 ロシアでは、傷ついた水っぽい腐敗はまだ重要ではありません。
この作業では、ベタル・ベロロシアン、スカルブ、および繁殖雑種の影響を受けたジャガイモ塊茎から分離された、傷ついた水腐れの原因物質の4つの株を、ベラルーシと園芸のための国立科学アカデミー(ミンスク地域)の科学実用センターの保管場所で調査しました。 研究の目的は、分離された分離株に属する種、ジャガイモ塊茎に関連するそれらの毒性を決定し、さまざまな周囲温度での成長とメタラキシルに対する耐性を評価することでした。
分離株の菌糸は液体エンドウ豆培地で成長させた(180gの冷凍グリーンピースを10リットルの蒸留水で1分間煮沸した後、30気圧で1分間オートクレーブした)。 DNAは各株から分離されました。 DNAを単離するために、凍結した菌糸を液体窒素で粉砕し、CTABバッファーで溶解し、次にクロロホルムで除タンパクしました。 DNAは–20°Сの脱イオン水中に保存されました。 プライマーITS18およびITS5,8(White、1)を使用して増幅された種特異的ゲノム領域(核リボソーム遺伝子1Sおよび2Sの領域、ならびに内部転写遺伝子間スペーサーITS1990の領域)のヌクレオチド配列の分析は、研究された株がPythium ultimumTrow種に属することを示した。 (同義語Globisporangium ultimum(Trow)Uzuhashi、Tojo&Kakish)。
研究されたすべての菌株は、湿ったチャンバーに置かれたガラポテト塊茎のスライスに影響を及ぼしました。 それらにダークスポットが形成され、後に湿った深く浸透した潰瘍に変わりました(図2)。 結核スライスの中央にP.ultimum菌糸を配置することにより感染を行った。
接種した塊茎ディスクを+ 22℃でインキュベートした。 患部の最大成長率は最初の2日間で記録され、その後潰瘍領域は実質的に変化しませんでした。
このパターンは、研究されたすべての菌株に有効でした。
菌株の成長速度は、5、15、24、および34°Cの温度のオート寒天培地で推定されました(図3)。 すべての温度で成長が観察されました。 最大成長率は24°Cで記録されました(86mmカップは2日で完全に生い茂りました)。 15°Cと34°Cでは、成長速度は大幅に低下しました(カップはそれぞれ4日と3日で大きくなりすぎました)。
15、24、および34°Cの温度では、調査したすべての菌株の成長率に差はありませんでした。 5°Cの温度では、P1株は他の株よりもはるかに速く成長し(20日目は4 mm)、P4-ややゆっくりと成長し(10日目は4 mm)、P2とP3は実際には成長しませんでした。
また、24°Cの温度では、皿に植えた直後に成長が始まり、15および34°Cの温度では、活発な成長の開始が1日遅れ、5°Cでは2日遅れたことにも注意してください。
メタラキシル(およびその異性体メフェノキサム)は、土壌卵菌の制御に最も効果的な薬剤として認識されています。 メタラキシルは塊茎に浸透し、(非常に低い濃度でも)それらの長期的な保護を提供することができます(Taylor et al。、2008、Bruin et al。、1982)。 ただし、メタラキシルの有効性は、集団に耐性株が出現した後、急激に低下します。 耐性の高い菌株が米国のいくつかの地域で発見されています(Taylor et al。、2002)。 Belarusian P. ultimum株のメタラキシルに対する耐性に関するデータはないため、この研究では薬剤に対する耐性をテストすることにしました。
殺菌剤メタラキシルに対する感受性の研究は、さまざまな濃度の殺菌剤を添加したオート麦寒天培地で実施されました(Pobedinskaya and Elansky、2014)。
研究された菌株は、メタラキシルに対する耐性にいくつかの違いがありました(表1)。 したがって、1 mg / Lの殺菌剤濃度では、P4株の成長は完全に停止し、残りの株は大幅に遅くなりました。 菌株P1およびP2は、メタラキシル濃度が10 mg / Lの培地で非常にゆっくりと成長しました。 すべての菌株について計算されたEC50の有効濃度(菌株の成長速度を対照と比較して2倍遅くする殺菌剤の濃度)は1mg / L未満でした。 したがって、調査したすべての株はメタラキシルに感受性でした。 P.ultimumの成長を阻害するのに非常に効果的であることが示されています。
ブルーインらによると。 (1982)植生中の植物を0,5kg / haの用量のメタラキシルで処理した後、塊茎における殺菌剤の蓄積は、周囲で0,055μg/ g、皮質層で0,022μg/ g、塊茎の中央部で0,034μg/ gでした。 私たちのデータによると、このメタラキシルの濃度は病気に対抗するには不十分ですが、その発達を遅らせることができます。
オート麦培地で成長させると、すべての菌株が単培養で卵胞子を形成し(図4)、これはP.ultimumに典型的です。 菌株のペアワイズスプライシングは、栄養不適合の目に見える症状を示さなかった-カップはミセリウムで均一に覆われていた。
得られたデータは、P。ultimumが、5°Cの保存温度を含む広い温度範囲で急速に成長することができる植物病原体であることを示しています。 それはジャガイモ塊茎の組織に毒性があり、長期生存が可能な卵胞子を形成します。 したがって、この種は危険な植物病原体であり、農業に脅威を与える可能性があり、追加の研究が必要です。
研究は、ロシア科学財団(プロジェクトN 14-50-00029)の支援を受けて実施されました。
表1.メタラキシルに対するP.ultimum株の感受性
株 | メタラキシル濃度、mg / l | ||
0(コントロール) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
約3回の測定の平均データが示されています。
ジャーナル「ポテトプロテクション」(1年第2017号)に掲載されました